【原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。
【配方】
霍亂弧菌顯色培養基配方(每升):
蛋白胨 15g
酵母膏粉 5g
蔗糖 10g
氯化鈉 5g
抑菌劑 5g
瓊脂 13g
色素 3.1g
終pH 9.0±0.2
【使用方法】
1、取瓶內干粉56.1克,用100ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。
2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min,或拍擊式均質器拍擊2 min,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的滅菌容器內,加225 mL堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
3、增菌:將上述1:10稀釋液于36 ℃±1 ℃培養6h~8h,如有需要可進行二次增菌。
4、分離
在增菌液中用接種環取一環,于霍亂弧菌顯色平板上劃線分離,于36 ℃±1 ℃培養18 h~24 h。
5、通過驗證試驗進一步確認假定性霍亂弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色等。
【質量控制】
本品傾注平皿后呈淡黃色
注:后的鑒定須做補充試驗。
外觀:
脫水培養基:淺黃色具流動性粉未。
制備好平板:淡黃色的膠。
儲存條件和保質期:
脫水培養基:10-30℃,保質期二年。 制備好平板: 2-8℃,多保存兩周。