【檢驗原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素,氯化鈉可維持均衡的滲透壓,十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌,瓊脂是培養基凝固劑;混合色素分別與大腸菌群和大腸桿菌所對應的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,使大腸菌群產生紫紅色的菌落,大腸桿菌產生藍綠色的菌落;大腸桿菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基質,與靛基質試劑作用,在大腸桿菌菌落周圍形成玫瑰吲哚而呈紅色。
【配方成分】
成分 | 含量(每升) | 成分 | 含量(每升) |
蛋白胨 | 10.0g | 瓊脂 | 12.0g |
酵母膏粉 | 3.0g | 十二烷基硫酸鈉 | 0.1g |
氯化鈉 | 5.0g | 混合色素 | 2.7g |
蒸餾水 | 1000ml | 終 pH 7.0±0.2
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【使用方法】
平板凝膠培養基使用:待檢樣品按照相應的標準(GB、SN、FDA等)進行處理后,取適量樣品液接種于該培養基上,于36±1℃培養18~24 h,觀察結果;如需進行靛基質試驗,則在可疑菌落上滴加一滴靛基質試劑后讀取結果:靛基質試驗陽性,菌落邊緣顯紅色;靛基質試驗陰性,菌落邊緣不顯紅色。
脫水干粉培養基使用: 稱取本品干粉32.8g,用1000mL蒸餾水或純水溶解。混合均勻加熱至100℃,并不斷攪拌直至*溶解,無需滅菌,冷至50℃左右,備用。(注:配制不同用量體積,可按比例擴增或縮小。)后續操作可參考“平板凝膠培養基使用”。
瓶裝凝膠培養基使用:將瓶裝凝膠培養基置于100℃水浴中加熱至*溶解,再冷至50℃左右,備用。
后續操作可參考“平板凝膠培養基使用”。
【質量控制】
1. 外觀方面:
脫水干粉培養基:淡黃色粉末。
平板凝膠/瓶裝凝膠培養基:淡黃色凝膠。
2. 生物學方面
下列質控菌株接種待測試培養基,36℃±1℃培養24h,結果如下:
質控菌株及編號 | 指標 | 質控評判標準 |
大腸桿菌ATCC25922 | 生長率 | PR≥0.7,藍綠色菌落,滴加一滴靛基質試劑,菌落邊緣顯紅色。 |
弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864 |
| PR≥0.7,品(紫)紅色菌落 |
鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028 | 特異性 | 生長良好,無色菌落。 |
糞腸球菌ATCC29212 | 選擇性 | G≤1,受抑制 |
【儲存條件及保質期】
脫水干粉:2-8℃,密封貯存,有效期兩年。
平板凝膠/瓶裝凝膠:2~8℃,避光保存,有效期三個月。
【注意事項】
1、稱量脫水干粉培養基時避免粉塵揚起,以免吸入粉塵引起呼吸道系統不適。
2、凝膠培養基在2-8℃保存時與存放容器冷凝管保持一定距離以免凍損壞。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正常現象。使用前應平衡至室溫。
3、質檢報告下載:首先,登錄環凱網站;然后,打開“客服中心”頁面,點擊“產品質檢報告”,輸入產品批號搜索即可。
【廢物處理】
檢測之后帶菌器皿置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
【執行標準】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養基